Nukleinsyreekstraktions- eller rensesæt
Nucleic Acid Extraktion Or Oprensning Kiteller opbevares ved -20 ℃. Prøven skal transporteres ved hjælp af 0℃ curling.
Introduction
Nukleinsyreekstraktions- eller rensesættet (Magnetic Beads Method) er designet til automatiseret oprensning af RNA og DNA fra kropsvæsker (såsom podepinde, plasma, serum) ved hjælp af automatiserede nukleinsyreekstraktionsinstrumenter. Magnetisk partikelteknologi giver højkvalitets DNA/RNA, der er egnet til direkte brug i downstream-applikationer såsom amplifikation eller andre enzymatiske reaktioner.
Application Range
Fuldblods-, plasma-, serum- og andre vævsprøver blev direkte lyseret og fordøjet. Den frigivne nukleinsyre blev selektivt adsorberet af superparamagnetiske nanometermagnetiske perler. Derefter blev proteinet, uorganiske saltioner og organiske urenheder fjernet ved vaskeopløsning. Til sidst blev nukleinsyren elueret med eluent for at opnå en ren nukleinsyreopløsning.
Kit Contents
Kat. Ingen. | YXN-VIRAL01-32A-BR | Komponenter | ||
-50A | - 100A | |||
Størrelse | 32 Tes | 50 Test | 100 test | |
Lysis buffer | 96 brønd Forpak ed Plader 2 stk | 25 ml | 50 ml | Surfactant og Tris |
Vaskebuffer I | ★15 ml | ★30 ml | Høj salt løsning | |
Vaskebuffer Il | ★6ml*2 | ★12ml*2 | Lav-salt opløsning | |
Elueringsbuffer | 10 ml | 20 ml | Lav-salt opløsning | |
MagaBio reagens | 1,0 ml | 2,0 ml | Magnetiske partikler | |
Håndbog(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Nbemærkninger:ForYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,tilsæt 15mL Absolut ethanol til ★15mL Wash Buffer I før brug; tilsæt 24mL absolut ethanol til ★6mL vaskebuffer Il før brug. | ||||
ForYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, tilsæt 30mL Absolut ethanol til ★30mL Wash Buffer I før brug; tilsæt 48mL absolut ethanol til ★12mL vaskebuffer Il før brug.【Reagenser, der skal tilberedes af brugeren】 Forbered venligst den absolutte ethanol (analytisk kvalitet) selv. |
Storage Conditions
Ved ankomsten af sættet kan kitets komponenter opbevares ved stuetemperatur (15 - 25°C). Reagenserne er stabile i op til et år fra fremstillingsdatoen.
Sample Requirements
1. Anvendelig prøve: Podninger, plasma, serum og fuldblod osv.
2. Prøveopbevaring og -transport: Prøven skal testes med det samme
Materials og Devices Required but Not Provided
1. Pudderfri engangshandsker
2. Biohazard-beholder
3. Blyant eller pr
Procedure
I det følgende bruges prøvestrimmelekstraktionspodepindlotion som et eksempel til kort at forklare operationstrinene for ekstraktionsreagenset på det biologiske nukleinsyreekstraktionsinstrumentBioer NPA-32PellerSMKUNST 32. For andre prøvetyper henvises til brugermanualen. Det kan også betjenes af kunder i henhold til eksperimentel erhvervelse:
1. Reagens Forberedelse
en. ForYXN-VB03-32A-50A og YXN-VB03-32A-100A
Tilsæt 500 uL lysisbuffer til kolonne 1 og 7 på 2,2 ml 96-dyb-brønds plade, 500 uL vaskebuffer I til kolonne 2 og 8, 500 uL vaskebuffer II til kolonne 3, 4 og 9,10; 70 uL elueringsbuffer til kolonne 5 og 11, 180 uL rent vand og 20 uL MagaBio-reagens til kolonne 6 og 12 (de magnetiske perler skal blandes grundigt før brug),
b. ForYXN-VB03-32A
Anbring de 96-brønds forpakkede reagenser ved stuetemperatur. Ryst 96-brønds pladen på hovedet i tre gange, og riv plastikposen af. Centrifuger det færdigpakkede reagens i nogle få sekunder (eller sving med hånden et par gange) for at undgå, at reagenset klæber til væggen af rørene. Riv aluminiumsfoliefilmen af 96-brønds plade og identificer pladens retning (magnetiske perler i kolonne #6 og #12),
2.Prøve Udvinding
1. Tilføj 300uL prøve til 96-brønds pladesøjler #1 og #7, undgå krydskontaminering,
2. Placer en plade med 96 dybe brønde på instrumentet, installer 8-stavs spidserne på instrumentet,
3. Kør programmet i henhold til følgende procedurer,
4. Når den automatiske oprensning er overstået, overføres elueringsbufferen i kolonne 5 og 11 til et rent antinuklear 0,5 ml centrifugerør; Hvis du ikke bruger det med det samme, skal du opbevare det ved -20 °C.
Performance Characteristics
1. Det ekstraherede produkt detekteres med højfølsomt HBV DNA-detektionsreagens for at nå en følsomhed på 10 IE/ml. Det ekstraherede produkt detekteres af højfølsomt HCV RNA-detektionsreagens for at nå en følsomhed på 50 IE/ml.
2. Udvælg 4 prøver (serum/plasmaprøve, nasopharyngeal podningsprøve, cervikal eksfolieret celleprøve), hver prøve fortyndes 10 gange med 3 gradienter (inklusive den oprindelige prøve i alt 4 koncentrationer), ved hjælp af kvalificerede reagenser og testmidler til at detektere interne referencegen i henhold til produktvejledningen, og Ct-værdien for hver batch afviger med mindre end 1.
Step | Godt Beliggenhed | Program Navn | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mi:SS) | Magnet Time(min:SS) | Adsorption | Stissede | Volume tatus (μL) | Temperature |
1 | 1 | Lysis | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Waske1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Waske2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Waske3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Eluering | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Kassér | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL SIKKERHED.
Brug af dette produkt på en måde, der ikke er specificeret i brugerdokumentationen, kan resultere i personskade eller beskadigelse af instrumentet eller enheden. Sørg for, at alle, der bruger dette produkt, har modtaget instruktioner i generel sikkerhedspraksis for laboratorier og sikkerhedsoplysningerne i dette dokument.
1.1 Før du bruger et instrument eller en enhed, skal du læse og forstå sikkerhedsoplysningerne i brugerdokumentationen fra producenten af instrumentet eller enheden.
1.2 Inden håndtering af kemikalier, skal du læse og forstå alle gældende sikkerhedsdatablade (SDS'er) og bruge passende personlige værnemidler (handsker, kitler, øjenværn osv.). For at få SDS'er, se afsnittet "Dokumentation og support" i dette dokument.
2. Kemisk sikkerhed
GENEREL KEMISK HÅNDTERING. For at minimere risici skal du sørge for, at laboratoriepersonale læser og praktiserer de generelle sikkerhedsretningslinjer for kemikaliebrug, opbevaring og affald, der er angivet nedenfor, og konsulterer det relevante sikkerhedsdatablad for specifikke forholdsregler og instruktioner: Læs og forstå sikkerhedsdatabladene (SDS'erne) leveret af kemikaliet producent, før du opbevarer, håndterer eller arbejder med kemikalier eller farlige materialer.
2.1 Minimer kontakt med kemikalier. Bær passende personlige værnemidler ved håndtering af kemikalier (for eksempel sikkerhedsbriller, handsker eller beskyttelsestøj).
2.2 Minimer indånding af kemikalier. Efterlad ikke kemikaliebeholdere åbne. Brug kun med tilstrækkelig ventilation (f.eks. stinkskab).
2.3 Tjek regelmæssigt for kemikalielækager eller spild. Hvis der opstår en lækage eller spild, skal du følge producentens oprydningsprocedurer som anbefalet i sikkerhedsdatabladet.
2.4 Håndter kemikalieaffald i et stinkskab.
2.5 Sikre brug af primære og sekundære affaldsbeholdere. (Et primært affald
beholder rummer det umiddelbare affald. En sekundær beholder indeholder spild eller utætheder fra den primære beholder. Begge beholdere skal være kompatible med affaldsmaterialet og opfylde føderale, statslige og lokale krav til opbevaring af beholdere.).
2.6 Efter tømning af en affaldsbeholder, forsegle den med den medfølgende hætte.
2.7 Karakteriser (ved analyse om nødvendigt) det affald, der genereres af de særlige applikationer, reagenser og substrater, der bruges i dit laboratorium.
2.8 Sørg for, at affaldet opbevares, overføres, transporteres og bortskaffes i overensstemmelse med alle lokale, statslige/provinsielle og/eller nationale bestemmelser.
2.9 Radioaktive eller biofarlige materialer kan kræve særlig håndtering, og bortskaffelsesbegrænsninger kan være gældende.
3.Biologisk fare sikkerhed
Potentiel biofare. Afhængigt af de prøver, der bruges på dette instrument, kan overfladen betragtes som en biologisk fare. Brug passende dekontamineringsmetoder, når du arbejder med biologiske farer.
BIOHARDE. Biologiske prøver såsom væv, kropsvæsker, infektionsstoffer og blod fra mennesker og andre dyr har potentiale til at overføre infektionssygdomme. Følg alle gældende lokale, statslige/provinsielle og/eller nationale bestemmelser. Bær passende beskyttelsesudstyr, som inkluderer, men ikke er begrænset til: beskyttelsesbriller, ansigtsskærm, tøj/laboratoriefrakke og handsker. Alt arbejde skal udføres i korrekt udstyrede faciliteter ved brug af passende sikkerhedsudstyr (f.eks. fysiske indeslutningsanordninger). Enkeltpersoner bør trænes i henhold til gældende lovgivning og virksomheds-/institutionskrav, før de arbejder med potentielt infektiøse materialer.
Læs og følg de gældende retningslinjer og/eller lovmæssige krav i det følgende:
I USA: US Department of Health and Human Services retningslinjer udgivet i Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories fundet på: www.cdc.gov/biosafety.
Arbejdsmiljøstandarder, blodbårne patogener (29 CFR§1910.1030), fundet på:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
Din virksomheds/institutions Biosafety Program-protokoller for arbejde med/håndtering af potentielt infektiøse materialer. Yderligere oplysninger om biohazard-retningslinjer er tilgængelig på: www.cdc.gov.
I EU: Tjek lokale retningslinjer og lovgivning om biohazard og biosikkerhedsforanstaltninger, og henvis til bedste praksis offentliggjort i World Health Organization (WHO) Laboratory Biosafety Manual, tredje udgave, fundet på: www.who.int/csr/resources/publications /biosikkerhed/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/da/.