Nyt Coronavirus(SARS-Cov-2) nukleinsyredetektionskit

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flumalmscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Nyt Coronavirus(SARS-Cov-2) nukleinsyredetektionskit (fluorescerende RT-PCR-sondemetode)

【Packaging specifications 】25 tests/sæt

【Intended usalder】

Dette kit bruges til kvalitativ påvisning af nukleinsyre fra ny coronavirus i nasopharyngeale podninger, oropharyngeale podninger (halspodninger), forreste nasale podninger, mid-turbinate podninger, næseskylninger og nasale aspirater fra personer, der er mistænkt for COVID19 af deres sundhedsudbyder. Påvisningen af ​​ORF1ab- og N-gener af det nye coronavirus kan bruges til hjælpediagnose og epidemiologisk overvågning af ny coronavirusinfektion.

【Principles of the procedure 】

Dette kit er designet til specifikke TaqMan-prober og specifikke primere designet til de nye coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab- og N-gensekvenser. PCR-reaktionsopløsningen indeholder 3 sæt specifikke primere og fluorescerende prober til specifik påvisning af mål, og et yderligere sæt specifikke primere og fluorescerende prober bruges som intern standardkontrol af sættet til påvisning af endogene husholdningsgener.

Testprincippet er, at den specifikke fluorescerende probe fordøjes og nedbrydes af exonukleaseaktiviteten af ​​Taq-enzymet i PCR-reaktionen, således at reporter-fluorescensgruppen og den quenchede fluorescerende gruppe adskilles, så fluorescensovervågningssystemet kan modtage en fluorescens. signal, og derefter Gennem berigelseseffekten af ​​PCR-amplifikation når fluorescenssignalet fra proben en indstillet tærskelværdi-Ct-værdi (cyklustærskel). I tilfælde af ingen målamplikon er probens reportergruppe tæt på quenching-gruppen. På dette tidspunkt forekommer fluorescensresonansenergioverførslen, og fluorescensen af ​​reportergruppen standses af quenching-gruppen, så det fluorescerende signal ikke kan detekteres af det fluorescerende PCR-instrument.

For at overvåge brugen af ​​reagenser under testen er sættet udstyret med positive og negative kontroller: den positive kontrol indeholder målstedets rekombinante plasmid, og den negative kontrol er destilleret vand, som bruges til at overvåge miljøforurening. Det anbefales at indstille en positiv kontrol og en negativ kontrol samtidigt ved testning.

【Main components 】

Note:(1) Komponenterne i forskellige batchsæt kan ikke blandes eller ombyttes.

(2) Forbered dit eget reagens: Nukleinsyreekstraktionssæt.

【Storage conditions og expiration date 】

For BST-SARS-25:Transporter og opbevarer ved -20±5℃ i lang tid.

For BST-SARS-DR-25:Transport ved stuetemperatur. Opbevares ved -20±5℃ i lang tid.

Undgå gentagne fryse-tø-cyklusser. Gyldighedsperioden er foreløbigt fastsat til 12 måneder.

Se etiketten for fremstillings- og brugsdato.

Efter første åbning kan reagenset opbevares ved -20±5 °C i højst 1 måned eller indtil slutningen af ​​reagensperioden, alt efter hvilken dato der kommer først, for at undgå gentagne fryse-optøningscyklusser og antallet af reagensfrysninger - optøningscyklusser bør ikke overstige 6 gange.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1.Anvendelig prøvetype: Ekstraheret nukleinsyreopløsning.

2. Opbevaring og transport af prøver: Opbevar ved -20±5 ℃ i 6 måneder. Frys og optø prøverne ikke mere end 6 gange.

【Tanslåeting method】

1.Nucleic acid extraction

Vælg et passende nukleinsyreekstraktionssæt til at ekstrahere viral nukleinsyre, og følg de tilsvarende kitinstruktioner. Det anbefales at bruge et nukleinsyreekstraktions- og oprensningskit produceret af Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. eller tilsvarende nukleinsyreoprensningskit.

2.  Reaction reagent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Fjern SARS-Cov-2-blandingen og enzymblandingen, smelt fuldstændigt ved stuetemperatur og bland grundigt med Vortex-enhed og centrifuger derefter kortvarigt.

(2) 16,5 uL Enzyme Mix blev tilsat til 358,5 uL SARS-Cov-2 Mix og blandet grundigt for at opnå den blandede reaktionsopløsning.

(3) Forbered et rent 0,2 mL PCR oktalrør og mærk det med 15 µL af ovenstående blandede reaktionsopløsning pr. brønd.

(4) Tilsæt 15 μL renset nukleinsyreopløsning, den positive kontrol og den negative kontrol, og dæk forsigtigt den oktale rørhætte.

(5) Bland godt ved at vende på hovedet, og centrifuger hurtigt for at koncentrere væsken i bunden af ​​røret.

1